兔子Ⅲ型前膠原肽（PⅢNP）ELISA試劑盒檢測說(shuō)明

兔子Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA試劑盒檢測說(shuō)明：

中文名：兔子Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA試劑盒
別名：兔子Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA Kit
供應商：上海仁捷
規格：48t/96t
保存：2~8℃
有效期：6個(gè)月
樣本：血清、血漿、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
特點(diǎn)：敏感性高、特異性強、重復性好、試劑穩定、易保存，操作簡(jiǎn)便。
用途：用于測定血清，血漿及相關(guān)液體樣本中相關(guān)含量或活性。
種屬：人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚(yú)等。
運輸方式：現貨供應，一般為快遞運輸，江浙滬隔天到，外地及偏遠地方三至五天時(shí)間到貨。
檢測原理：采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。

兔子Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA試劑盒標本要求：
包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。
1.血清：
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應再次離心。
2.血漿：
應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應再次離心。
3.尿液：
用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
4.細胞培養上清：
檢測分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時(shí)，用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應再次離心。
5.組織標本：
切割標本后，稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4)，用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

兔子Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA試劑盒特點(diǎn)：
1、專(zhuān)一性強?？乖c抗體的免疫反應是專(zhuān)一反應，而免疫酶技術(shù)以免疫反應為基礎，所檢測的對象是抗原（或抗體），使用的抗體除標記了酶以外，與普通抗體的免疫反應特性并無(wú)多大差別。
2、靈敏度高。由于抗體聯(lián)結上了酶，因此，借助于酶與底物的顯色反應，顯示抗原與抗體的結合，大大提高了檢測的靈敏性，使檢測水平接近放射免疫測定法。
3、樣品易保存。經(jīng)過(guò)酶反應顯示的有色產(chǎn)物大多比較穩定，因此有利于樣品的保存。
4、結果易觀(guān)察。對檢測結果即可用肉眼觀(guān)察，又可用顯微鏡觀(guān)察，也可以用分光光度計進(jìn)行比色測定，還可用顯微鏡觀(guān)察。這是因為某些酶反應產(chǎn)物能使電子密度發(fā)生改變，從而引起被檢測物的顯示。
5、可以定量測定。溶液中的抗原物質(zhì)，應用酶免吸附技術(shù)進(jìn)行比色測定，依據光密度值的變化，可以定量。預計用細胞分光光度計可對組織內的抗原進(jìn)行免疫酶技術(shù)的定量測定。
6、可以大規模測定樣品。如有成千上萬(wàn)份樣品需要進(jìn)行檢測，免疫酶技術(shù)都能在較短時(shí)間內完成。
7、.儀器和試劑簡(jiǎn)單。對免疫沒(méi)技術(shù)來(lái)說(shuō)，不需要熒光顯微鏡，也不需要測定放射性的特殊儀器，所用儀器及試劑均屬一般性?xún)x器與試劑，普通實(shí)驗室及生產(chǎn)應用單位均易購置。

兔子Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA試劑盒操作步驟：
1、使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時(shí)加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。
2、根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個(gè)標準品和空白孔建議做復孔。每個(gè)樣品根據自己的數量來(lái)定，能使用復孔的盡量做復孔。
3、加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時(shí)。
4、甩去孔內液體，每孔加滿(mǎn)洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次。
5、每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。
6、甩去孔內液體，每孔加滿(mǎn)洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次。
7、每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。
8、取出酶標板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應立即測定結果。
9、在450nm波長(cháng)處測定各孔的OD值。

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