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磷酸化蛋白激酶BELISA試劑盒(種屬:人)
試劑盒名稱(chēng) | 磷酸化蛋白激酶B(PPKB)ELISA試劑盒 | |
規格 | 48T/96T | |
品牌 | RENJIEBIO | |
檢測方法 | ELISA酶聯(lián)免疫法 | |
檢測波長(cháng) | 450nm | |
樣本 | 血清、血漿、組織、細胞上清液等 | |
樣本體積 | 50~100ul | |
研究領(lǐng)域 | 神經(jīng)生物學(xué)、新陳代謝、免疫學(xué)等 | |
使用范圍 | 僅用于科研實(shí)驗 | |
保存 | 2~8℃,避光保存 |
磷酸化蛋白激酶BELISA試劑盒(種屬:人)流程如下:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個(gè)平行孔;設兩個(gè)陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個(gè)空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl?!?br />(2)酶標板置4℃,包被過(guò)夜。
(3)洗板:吸干孔內反應液,用洗滌液過(guò)洗一遍(將洗滌液注滿(mǎn)板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿(mǎn)板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl?!?br />(5)酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min?!?br />(6)洗板,同(4)?!?br />(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl?!?br />(8)酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min?!?br />(9)洗板,同(4)?!?br />(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min?!?br />(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應?!?br />(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,zui終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數據處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標準。
產(chǎn)品優(yōu)勢:
一、高效、靈敏、特異的抗體;
二、穩定的重復性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;
四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養上清液、尿液等等多種標本類(lèi)型;
五、*,質(zhì)量保證,zui大限度的節省實(shí)驗經(jīng)費。
標準曲線(xiàn)計算
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