上海仁捷生物-豬 KL-6 ELISA試劑盒檢測方法

豬Ⅱ型肺泡細胞表面抗原（KL-6）試劑盒（ELISA）

操作步驟

1.   從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.   設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；
3.   樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。
4.   除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.   棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿(mǎn)洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）。
6.   每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7.   每孔加入終止液50μL，15min內，在450nm波長(cháng)處測定各孔的OD值。

實(shí)驗結果計算

以所測標準品的OD值為橫坐標，標準品的濃度值為縱坐標，在坐標紙上或用相關(guān)軟件繪制標準曲線(xiàn)，并得到直線(xiàn)回歸方程，將樣品的OD值代入方程，計算出樣品的濃度。

試劑盒性能

•  檢測范圍：25 IU/mL – 800 IU/mL。
•  靈敏度：zui低檢測濃度小于1.0 IU/mL。
•  特異性：不與其它可溶性結構類(lèi)似物交叉反應。
•  重復性：板內變異系數小于10% ，板間變異系數小于15% 。

試劑盒組成

備注：

1.  標準品濃度依次為：800、400、200、100、50、25 IU/mL

2.  經(jīng)過(guò)大量正常標本檢驗，標本的正常濃度值均在試劑盒提供的檢測范圍內，實(shí)驗過(guò)程中直接取50μL樣本上樣即可。當有部分樣本值超過(guò)zui大標準品濃度時(shí)，可用樣本稀釋液將標本進(jìn)行適當稀釋后再進(jìn)行實(shí)驗。

l 本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織勻漿及相關(guān)液體樣本中豬Ⅱ型肺泡細胞表面抗原（KL-6）的含量。

l 有效期：6個(gè)月

l 保存條件：2-8℃