根據樣品中檢測物水平來(lái)選擇科研ELISA試劑盒

根據實(shí)驗物種及待檢樣品性質(zhì)來(lái)選擇科研ELISA試劑盒
如果實(shí)驗君的實(shí)驗樣品為人、小鼠或大鼠樣品，那么要選擇一個(gè)合適的試劑盒相對容易，但如果您的實(shí)驗樣品來(lái)源于其他物種如雞、牛、猴等，則市面上能提供的試劑盒種類(lèi)卻很少。且不可輕信能提供近萬(wàn)種試劑盒，覆蓋多物種的供應商。但如果又非要檢測這些物種的指標時(shí)，要對待檢物(如有種屬差異性)進(jìn)行同源性分析以及試劑盒的種屬交叉反應數據。對于樣品類(lèi)型而言，一般的商業(yè)化試劑盒都經(jīng)過(guò)血清、血漿和細胞培養上清液的驗證。在選擇試劑盒時(shí)，要詳細閱讀說(shuō)明書(shū)，比如血漿樣本抗凝劑的使用是否與試劑盒兼容。另外，在某些情形下樣品中會(huì )存在干擾因素比如溶血血漿、高脂肪含量的樣品、人抗鼠抗體(HAMA)、細胞培養上清中含胎牛血清等。因此需根據樣品來(lái)選擇試劑盒，必要時(shí)還要根據樣本來(lái)適當優(yōu)化?；蛟跇悠肥占?，先閱讀一些可靠供應商試劑盒的說(shuō)明書(shū)或直接咨詢(xún)。如果您的樣品為組織或細胞裂解物，則需要更謹慎的選擇試劑盒。市面上大多數的商業(yè)化試劑盒沒(méi)有經(jīng)過(guò)多種來(lái)源組織樣本的驗證。這需要實(shí)驗君能理解不是所有試劑盒所用的抗體對，都能特異的從一堆裂解物蛋白中特異檢出您的目的蛋白，還要考慮組織樣品的基質(zhì)效應(Matrix Effect)等。但如果實(shí)驗君要了解組織樣品的制備問(wèn)題，我們另起一文來(lái)總結。
根據樣品中檢測物水平來(lái)選擇科研ELISA試劑盒
如果實(shí)驗君對于樣品中待檢物的水平?jīng)]有任何可參考的數據，選擇寬動(dòng)力學(xué)檢測范圍的試劑盒。如果樣品中待檢物的含量很低，建議選擇高靈敏度的試劑盒。為了降低基質(zhì)效應，有必要用稀釋液至少做2倍稀釋。如果樣品中待檢物含量遠超過(guò)試劑盒的檢測范圍（標曲范圍）， 也需做適當的倍數稀釋。在zui后計算結果時(shí)，需乘以相應的稀釋倍數。
根據樣本可獲得性來(lái)選擇科研ELISA試劑盒
通常而言，商業(yè)化試劑盒的樣品用量都在50ul或100ul, 但也有一些供應商的試劑盒對樣品的用量要求可少至10ul。如果您的樣品很珍貴或較難獲取，則需要認真考慮試劑盒對樣品用量的要求。如果樣品量少，且要做多因子檢測時(shí)更需謹慎。
細致比較科研ELISA試劑盒關(guān)鍵性技術(shù)參數
ELISA試劑盒的關(guān)鍵技術(shù)參數包括板內差異性、板間差異性、批間差異性、重復性、特異性及交叉反應性、回收率等。如果實(shí)驗君經(jīng)常開(kāi)展ELISA實(shí)驗，建議使用同一廠(chǎng)家的試劑盒，這樣可盡量保證數據的重復性(當然前提是實(shí)驗條件的一致性)。對于科研用的定量ELISA試劑盒，不同的生產(chǎn)廠(chǎng)家使用的抗體對、酶以及底物、生產(chǎn)工藝和研發(fā)實(shí)力不盡相同，自然不同廠(chǎng)家試劑盒測出的數據會(huì )有差異。