倉鼠Elisa試劑盒樣品稀釋的方法和步驟

更新時(shí)間：2022-05-17

瀏覽次數：823

　　倉鼠Elisa試劑盒檢測的原理是采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗。計算方法是以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，在半對數坐標紙上繪出標準曲線(xiàn)，根據樣品的OD值由標準曲線(xiàn)查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線(xiàn)的直線(xiàn)回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數，即為樣品的實(shí)際濃度。

　　倉鼠Elisa試劑盒在沒(méi)有去離子水或雙蒸水時(shí)，可以使用娃哈哈純凈水配制溶液，切勿使用自來(lái)水。

　　1.樣品稀釋?zhuān)好嘎?lián)免疫反應是一種敏感性很高的反應，如果血清不稀釋?zhuān)豢杀苊鈺?huì )產(chǎn)生很強的非特異性反應，出現假陽(yáng)性。因此，國外檢測血清抗體的試劑盒，均規定將血清稀釋至適當的倍數，以降低非特異性反應，使特異性的抗原抗體反應充分體現出來(lái)。樣品稀釋倍數均通過(guò)大量試驗確定，以保證試驗的靈敏度和特異性。但是，有些用戶(hù)未能?chē)栏癜词褂谜f(shuō)明書(shū)操作，如產(chǎn)品應取10u1樣品進(jìn)行稀釋?zhuān)瑐€(gè)別用戶(hù)取5u1甚至1u1樣品進(jìn)行稀釋?zhuān)捎谖焐喜豢杀苊獾卣从袠悠芬约拔⒘恳埔浩鞯木炔粔?，因此造成樣品稀釋倍數不準確，檢測結果出現問(wèn)題。

　　2.試劑盒平衡：試劑盒中所有試劑和板條均應在試驗前平衡至室溫（約25℃），一般需在室溫放置20~30分鐘以上。平衡時(shí)間太短會(huì )造成試劑混勻不夠，樣品孵育時(shí)間相對縮短，ELISA反應不夠充分。冬季室溫低，可將試劑盒打開(kāi)盒蓋置37℃溫箱20分鐘。稀釋前、后的樣品需要充分混勻，所有試劑在加樣前也須搖勻，以保證試驗的均一性。

　　3.加樣：盡量操作規范，將液體垂直懸空快速加入到微孔板中，避免加到孔避上。加完試劑后用手適當振蕩或在桌面適當作圓周運動(dòng)，使孔內試劑充分混勻，蓋好蓋板膜。

　　4.洗板：洗液盡量不要溢出孔外；加洗液后要靜置10-15s，甩去板孔中洗液后，一定要用力拍干；及時(shí)更換吸水紙，尤其是拍過(guò)酶標記物的吸水紙一定要棄去，否則可能影響試驗結果。

上一篇：魚(yú)ELISA試劑盒操作中有哪些技術(shù)優(yōu)勢呢？
下一篇：上海ELISA試劑盒可以分為哪幾種常用類(lèi)選呢