Gibco胎牛血清是細胞培養中用量大的天然培養基,含有豐富的細胞生長(cháng)必須的營(yíng)養成份,常用于動(dòng)物細胞的體外培養,具有極為重要的功能。
1.提供對維持細胞指數生長(cháng)的激素,基礎培養基中沒(méi)有或量很少的營(yíng)養物,以及主要的低分子營(yíng)養物。
2. 提供結合蛋白,能識別維生素、脂類(lèi)、金屬和其他激素等,能結合或調變它們所結合的物質(zhì)活力。
3.有些情況下結合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結合,起到解毒作用。
4.是細胞貼壁、鋪展在塑料培養基質(zhì)上所需因子來(lái)源。
5.起酸堿度緩沖液作用。
6.提供蛋白酶抑制劑,使在細胞傳代時(shí)使剩余胰蛋白酶失活,保護細胞不受傷害。
Gibco胎牛血清操作步驟:
血清通常在細胞培養中作為基礎生長(cháng)培養基的添加劑。常用血清是胎牛血清(FBS),也稱(chēng)FCS。胎牛血清是從適合人類(lèi)衛生習慣的農場(chǎng)收集的。有時(shí),也可能用其他的牛血清,如新生牛血清或者供體牛血清。在細胞培養中,血清供應了豐富的高分子蛋白,低分子量營(yíng)養物,疏水載體蛋白和其他體外細胞生長(cháng)必要的成分如激素和粘附因子。同時(shí),血清可以增加培養基的緩沖能力或中和有毒成分,起到保護細胞的作用。在細胞培養過(guò)程中是否選擇添加血清,主要根據基礎培養基化學(xué)成分,培養細胞的類(lèi)型和培養體系而定。
1、采集
在胎牛血清生產(chǎn)過(guò)程中,全血使用無(wú)菌一次性塑料袋收集,待凝結后分離,收集和冷凍儲存血清??刂铺ヅQ宓某跏际占强刂平K血清產(chǎn)品質(zhì)量的關(guān)鍵因素。只有初始原料符合我們的規范時(shí)才能允許生產(chǎn)。
2、血清原料
在市場(chǎng)存在兩個(gè)胎牛血清標準:美國農業(yè)部標準(USDA)和歐洲標準。美國農業(yè)部標準,原始血清必須采自未發(fā)生瘋牛?。˙SE)和口蹄疫(FMD)疫情的國家,才可自由進(jìn)口到任何國家,用于安全生產(chǎn)。而且研究者只有使用符合這種標準的血清,才被允許將其細胞和細胞產(chǎn)品送至其他同樣有嚴格進(jìn)口條款的國家,進(jìn)行合作交流。
3、處理過(guò)程
優(yōu)選數個(gè)批次凍存血清進(jìn)行解凍,檢驗其內毒素和血紅素的含量,滿(mǎn)足標準的才能在冷藏條件下充分混合繼續加工,進(jìn)一步進(jìn)行過(guò)濾除菌。NQBB依次通過(guò)預過(guò)濾和膜過(guò)濾來(lái)處理胎牛血清。后的過(guò)濾步驟為連續三次用100nm的濾膜過(guò)濾。過(guò)濾結束,血清采用無(wú)菌工藝進(jìn)行分裝,整個(gè)過(guò)程有效確保終產(chǎn)品無(wú)菌。血清生產(chǎn)的空氣潔凈度為100級。所有分裝工作臺都通過(guò)高效微??諝膺^(guò)濾器過(guò)濾,并保持正壓分裝環(huán)境,對總微粒、懸浮微粒數和壓力進(jìn)行監控。分裝后,終產(chǎn)品迅速-20度凍存,并隔離,直到所有的質(zhì)量控制檢測完成。
4、FBS質(zhì)量控制
每批胎牛血清檢測確認符合各項標準,并以書(shū)面的方式記錄在質(zhì)檢報告中。
5、質(zhì)量保證
胎牛血清生產(chǎn)過(guò)程在一個(gè)嚴格控制的條件下進(jìn)行。紫外線(xiàn)滅菌,過(guò)濾除菌和分裝是關(guān)鍵生產(chǎn)環(huán)節,可以確保血清的品質(zhì)。與血清生產(chǎn)相關(guān)的數據作為專(zhuān)門(mén)的檔案記錄,從初步采集的原料到成品儲存的整個(gè)生產(chǎn)過(guò)程,以及質(zhì)量控制檢測和結果都有備案,并可以在監控條件下追溯源文件。 胎牛血清生產(chǎn)過(guò)程遵循歐洲議會(huì )關(guān)于體外診斷的標準。