魚(yú)ELISA試劑盒可以利用酶催化底物反應的生物放大作用

魚(yú)ELISA試劑盒技術(shù)雖已廣泛應用于免疫學(xué)的研究與診斷，但是熒光抗體染色標本不能長(cháng)期保存，對組織細胞的細微結構分辨不清，免疫酶技術(shù)則能克服上述不足，標記免疫酶技術(shù)的敏感性更優(yōu)于免疫熒光法，對石蠟切片標本尤為適用，為免疫病理研究開(kāi)辟了一條新途徑，酶顯色產(chǎn)物具有較高的電子密度，經(jīng)過(guò)適當處理還可以進(jìn)行免疫電鏡觀(guān)察，免疫酶組化技術(shù)分為酶標記法與非標記抗體技術(shù)，前者是將酶通過(guò)交聯(lián)劑結合在抗體分子上，形成酶標記抗體。后者是將酶作為抗原與相應的特異性抗體連接進(jìn)行的免疫反應，稱(chēng)為非標記抗體酶技術(shù)。
魚(yú)ELISA試劑盒技術(shù)利用酶催化底物反應的生物放大作用，提高特異性抗原-抗體免疫學(xué)反應檢測敏感性的一種標記免疫技術(shù)。該技術(shù)所用的酶要求純度高、催化反應的轉化率高、專(zhuān)一性強、性質(zhì)穩定、來(lái)源豐富、價(jià)格不貴、制備成的酶標抗體或抗原性質(zhì)穩定，繼續保留著(zhù)它的活性部分和催化能力。在受檢標本中不存在與標記酶相同的酶。另外它的相應底物應易于制備和保存，價(jià)格低廉，有色產(chǎn)物易于測定，光吸收高。
ELISA試劑盒固相載體采用免疫酶技術(shù)
魚(yú)ELISA試劑盒技術(shù)的主要試劑為固相的抗原或抗體、酶標記的抗原或抗體和與標記酶直接關(guān)聯(lián)的酶反應底物?？勺鞴滔噍d體的物質(zhì)很多，zui常用的是聚苯乙烯。聚苯乙烯具有較強的吸附蛋白質(zhì)的性能，抗體或蛋白質(zhì)抗原吸附其上后保留原來(lái)的免疫活性。聚苯乙烯為塑料，可制成各種形式，在測定過(guò)程中，它作為載體和容器，不參與化學(xué)反應，加之它的價(jià)格低廉，所以被普遍采用。
魚(yú)ELISA試劑盒的形狀主要有三種：小試管、小珠和微量反應板。小試管的特點(diǎn)是還能兼作反應的容器，zui后放入分光光度計中比色。小珠一般為直徑0.6cm的圓球，表面經(jīng)磨砂處理后吸附面積大增加。如用特殊的洗滌器，在洗滌過(guò)程中使圓珠滾動(dòng)淋洗，效果更好。zui常用的載體為微量反應板，于ELISA測定的產(chǎn)品也稱(chēng)為ELISA板，通用的標準板形是8×12的96孔式。為便于作少量標本的檢測，有制成8聯(lián)或l2聯(lián)孔條的，放入座架后，大小與標準ELISA板相同。ELISA板的特點(diǎn)是可以同時(shí)進(jìn)行大量標本的檢測，并可在特定的比色計上迅速讀出結果?，F在已有多種自動(dòng)化儀器用于微量反應板型的ELISA檢測，包括加樣、洗滌、保溫、比色等步驟，對操作的標準化極為有利。
1、魚(yú)ELISA試劑盒基因工程試劑對免疫測定技術(shù)發(fā)展的影響
免疫測定技術(shù)的基礎在于抗原抗體之間的特異結合反應，所以任何的診斷試劑離不開(kāi)的原料，如抗原抗體，酶等。以前用于免疫測定的抗原通常為各種純化抗原，而抗體則為純化抗原免疫動(dòng)物后獲得的多克隆抗體和使用雜交瘤技術(shù)得到的單克隆抗體，而抗原或抗體的標記物如酶標結合物則通過(guò)各種化學(xué)合成方法制備。近年來(lái)，隨著(zhù)分子生物學(xué)的發(fā)展，使用基因工程方法制備各種特殊的抗原或抗體及其酶結合物等免疫測定試劑幾成為現實(shí)的新一代試劑，各種新型使用的測定方法也不斷出現。
2、魚(yú)ELISA試劑盒基因工程
較早用于免疫測定的基因工程抗原是HBcAg和HBsAg,這兩種基因工程抗原的出現，較好地解決了抗HBc和HBe的測定問(wèn)題。因為要從病毒本身去大量獲取這兩種純抗原較為困難，并且這一點(diǎn)對于難培養的病原微生物來(lái)說(shuō)，如HIV、HCV和梅毒螺旋體等都有些共性。
魚(yú)ELISA試劑盒HCV目前尚不能體外培養，只能用基因工程或化學(xué)合成方法獲取HCV結構和非結構區的各種抗原片斷，已知HCV基因組有7個(gè)功能區組成：核心、E1、E2/NS1 NS2 NS3 NS4 NS5（有分為NS和NS5b）區，合成抗原的優(yōu)點(diǎn)是易于純化，特異性好，抗原抗體反應強。