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ELISA試劑盒使用中的十個(gè)要領(lǐng)

更新時(shí)間:2022-05-26      瀏覽次數:758
  ELISA試劑盒是一種敏感性高、特異性強、重復性好的ELISA試劑盒,其試劑安穩、易保留、操作簡(jiǎn)練、作用區分客觀(guān)等要素,適宜于大規模篩查實(shí)驗又能夠用于少數標本的檢查,能夠做定性實(shí)驗也能夠做定量分析。
  ELISA試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被人心型脂肪酸結合蛋白(h-FABP)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經(jīng)過(guò)溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成*終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人心型脂肪酸結合蛋白(h-FABP)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長(cháng)下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。
  ELISA試劑盒在使用時(shí)的要領(lǐng):
  1、試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開(kāi)封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
  2、濃洗滌液可能會(huì )有結晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結果。
  3、各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時(shí)間醉好控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。
  4、請每次測定的同時(shí)做標準曲線(xiàn),醉好做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標準品孔第—孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時(shí)請醉后乘以總稀釋倍數(×n×5)。
  5、封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
  6、底物請避光保存。
  7、嚴格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
  8、所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
  9、本試劑不同批號組分不得混用。
  10、如與英文說(shuō)明書(shū)有異,以英文說(shuō)明書(shū)為準。
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