如何使elisa試劑盒反響值添加?

更新時(shí)間：2021-11-16

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　　今天小編教您如何才能使elisa試劑盒反響值添加?都要注意些什么呢?

　　ELISA試劑盒實(shí)驗在必定溫度下的反響時(shí)刻并不是反響的結尾，溫育時(shí)刻過(guò)短、溫度過(guò)低，易致顯色不全;溫育時(shí)刻過(guò)長(cháng)、溫度過(guò)高，易致非特異性緊附于反響孔周?chē)?，難以清潔*，發(fā)生陰性高值或假陽(yáng)性反響。

　　要嚴厲按規則的溫度和溫育時(shí)刻進(jìn)行。如果參加的酶物過(guò)多或加在較高的孔壁上或孔口，也會(huì )致使本底添加或假陽(yáng)性。

　　水浴箱門(mén)，嚴厲控制水浴的溫度為37±0.5。同時(shí)，微孔板不可堆疊放置，以確保傳熱均勻，各板的溫度都能敏捷到達平衡。

　　當標本收集保留不妥發(fā)生溶血時(shí)，紅細胞中的血紅蛋白釋放到血清中，血紅蛋白具有過(guò)氧化物酶的性質(zhì)，其通過(guò)吸附或“PP效應"(蛋白質(zhì)間相互吸附的景象)后，可催化A、B液顯色而形成假陽(yáng)性。

　　因為試劑盒一般設定的反響溫度為37度，在這個(gè)溫度下溫育必定時(shí)刻，蒸騰的水分會(huì )許多，關(guān)于全部反響系統來(lái)講，各種反響物的濃度會(huì )不斷地添加，這么必會(huì )致使反響z終的值添加。

　　如果ELISA試劑盒樣品稀釋液少加或血清多加，都會(huì )致使本底增高。關(guān)于間接法來(lái)說(shuō)，受上述兩個(gè)因素影響更大。

　　因為血清中受檢的特異性IgG只，IgG中的一小有些。IgG的吸附性很強，非特異性IgG可直接吸附到固相載體上，有時(shí)也可吸附到包被抗原的外表。

　　這些非特異性的IgG均能夠和酶標二抗發(fā)作反響而形成較高陰性本底或假陽(yáng)性。假如參加的血清過(guò)多，高于規則的稀釋倍數，很容易形成高值陰性。反之，形成假陰性。

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