小鼠白細胞介素18ELISA檢測試劑盒分析方法

小鼠白細胞介素18ELISA檢測試劑盒分析方法

1、血清：操作過(guò)程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血紅細胞迅速小心地分離。
2、血漿：EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3、細胞上清液：1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4、組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液。
5、保存：如果樣品不立即使用，應將其分成小部分-70℃保存，避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

小鼠白細胞介素18ELISA檢測試劑盒分析方法
ELISA是以免疫學(xué)反應為基礎，將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的高效催化作用相結合起來(lái)的一種敏感性很高的試驗技術(shù)。
1.不同廠(chǎng)家生產(chǎn)的試劑盒因生產(chǎn)工藝和操作方法略有不同，務(wù)必按照所用試劑盒嚴格操作，否則容易產(chǎn)生檢測結果的不確定性.
2.若不同批號人ELISA試劑盒的不同組分(A液或酶工作液)，或不同試劑的不同組分進(jìn)行交叉使用，有可能出現顯色淺或本底高，花板等情形。
3.反應時(shí)間的誤差，做大量標本時(shí)，Di一孔和最后一孔以及一些特殊標本可能影響較大。
4.臨界值附近標本波動(dòng)為正?，F象，任何試劑均不可避免?？梢钥紤]將標本做奇數次復檢。

準備試劑，樣品和標準品 
 
加入準備好的樣品和標準品，37℃反應30分鐘
 
洗板4次，加入酶標試劑，37℃反應30分鐘
 
洗板4次，加入顯色液A、B，37℃顯色15分鐘
 
加入終止液
 
15分鐘之內讀OD值