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你知道大鼠Elisa試劑盒有哪兩種洗滌方法嗎?

更新時(shí)間:2020-09-25      瀏覽次數:601
  大鼠Elisa試劑盒實(shí)驗是一種敏感性高,特異性強,重復性好的實(shí)驗診斷方法。由于其試劑穩定、易保存,操作簡(jiǎn)便,結果判斷較客觀(guān)等因素,已廣泛應用在免疫學(xué)檢驗的各領(lǐng)域中。
  大鼠Elisa試劑盒操作步驟
  1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
  2.設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
  3.待測樣本孔先加待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;
  4.隨后標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
  5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
  6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
  7.E2檢測大鼠Elisa試劑盒每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長(cháng)處測定各孔的OD值。
  大鼠Elisa試劑盒洗滌的兩大方法
  一、浸泡式
  1.吸干或甩干孔內反應液;
  2.用洗滌液過(guò)洗一遍(將洗滌液注滿(mǎn)板孔后,即甩去);
  3.浸泡,即將洗滌液注滿(mǎn)板孔,放置1-2分鐘,間歇搖動(dòng),浸泡時(shí)間不可隨意縮短;
  4.吸干孔內液體。吸干應*,可用水泵或真空泵抽吸,也可甩去液體后在清潔毛巾或吸水紙上拍干;
  5.重復操作c和d,洗滌3-4次(或按說(shuō)明規定)。在間接法中如本底較高,可增加洗滌次數或延長(cháng)浸泡時(shí)間。
  二、流水沖洗式
  初用于小珠載體的洗滌,洗滌液僅為蒸餾水甚至可用自來(lái)水。洗滌時(shí)附接一特殊裝置,使小珠在流水沖擊下不斷地滾動(dòng)淋洗,持續沖洗2分鐘后,吸干液體,再用蒸餾水浸泡2分鐘,吸干即可。浸泡式猶如盆浴,流水沖洗式則好比淋浴,其洗滌效果更為*,且也簡(jiǎn)便、快速。已有實(shí)驗表明,流水沖洗式同樣也適用于微量滴定板的洗滌。洗滌時(shí)設法加大水流量或加大水壓,讓水流沖擊板孔表面,洗滌效果更佳。
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