上海ELISA試劑盒的檢測范圍和實(shí)驗應該注意的問(wèn)題

更新時(shí)間：2019-07-25

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　　上海ELISA試劑盒的檢測范圍和實(shí)驗應該注意的問(wèn)題

　　ELISA實(shí)驗中應注意的問(wèn)題有：樣品稀釋、試劑盒平衡、樣品與試劑混合、樣品添加、培養等。上海ELISA試劑盒具有準確度高、靈敏度高、特異性強等優(yōu)點(diǎn)，深受廣大用戶(hù)的喜愛(ài)。

　　上海ELISA試劑盒的應用種屬、檢測樣本的種類(lèi)：除試劑盒特別說(shuō)明外，一般不同種屬不能通用。常見(jiàn)待測樣本種類(lèi)有：血清和血漿(不同抗凝劑)，細胞上清，和細胞裂解液，試劑盒中不同樣本的稀釋液不混用;

　　上海ELISA試劑盒的檢測范圍：也就是標曲范圍，特別要注意待測樣本濃度是否落在標曲范圍內，對于濃度很高的樣本，可以先進(jìn)行預實(shí)驗摸索到比較好的稀釋倍數后再大量測定樣本。

　　elisa中的稀釋線(xiàn)性及回收率：

　　a.稀釋線(xiàn)性一般指樣本稀釋線(xiàn)性，是將樣本梯度稀釋下來(lái)，看各稀釋梯度濃度是否成線(xiàn)性;參考樣本稀釋線(xiàn)性可以選擇樣本的稀釋倍數;

　　b.稀釋線(xiàn)性也有做加標稀釋線(xiàn)性的情況，加標稀釋線(xiàn)性是將標準品加入樣本中測定加入的標準品濃度測定是否準確;同樣也是確定待測樣本稀釋倍數的參考指標。一般線(xiàn)性和回收率的范圍在80%-120%比較合適;

　　上海ELISA試劑盒的其它指標：

　　a.靈敏度：試劑盒能夠檢測到的樣本低濃度的能力，如果待檢指標含量很低，需要選擇高靈敏度的ELISA試劑盒;

　　b.板間和板內的變異系數(CV%):反映板內和不同板之間是否均勻，CV%一般小于10%比較好。

　　試劑盒的有效期：試劑盒的有效期一般是半年至一年，樣本準備時(shí)間需要考慮到試劑盒的有效期。

　　ELISA法已被廣泛應用于各種抗原和抗體的測定中。ELISA的測定有許多影響因素。除了正常的反應外，在檢測過(guò)程中經(jīng)常會(huì )出現一些錯誤的結果。導致ELISA測定結果錯誤的主要原因是：樣品因素；試劑因素；操作因素。

　　上海ELISA試劑盒樣品稀釋

　　常用產(chǎn)品的稀釋倍數由大量試驗確定，以確保試驗的敏感性和特異性。酶聯(lián)免疫吸附反應(ELISA)是一種高度敏感的反應。如果不稀釋血清，則不可避免地會(huì )產(chǎn)生強烈的非特異性反應和假陽(yáng)性。

　　二.工具包平衡

　　所有ELISA試劑和試紙條應在試驗前與室溫(約25℃)保持平衡，并應在室溫下放置20分鐘以上。過(guò)短的平衡時(shí)間會(huì )導致試劑混合不足、孵育時(shí)間縮短和ELISA反應不足。在冬季低溫下，試劑盒可放置在37℃處20分鐘。

　　三.樣品和試劑的混合

　　上海ELISA試劑盒樣品在稀釋前后必須充分混合，所有試劑必須在加入樣品前搖勻，以確保試驗的均勻性。