大鼠Bcl-X ELISA檢測試劑盒檢測范圍:
- 檢測范圍:6.25 ng/mL – 200 ng/mL。
- 靈敏度:低檢測濃度小于1.0 ng/mL。
- 特異性:不與其它可溶性結構類(lèi)似物交叉反應。
- 重復性:板內變異系數小于10% ,板間變異系數小于15% 。
實(shí)驗原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被大鼠B細胞淋巴瘤-X(Bcl-X)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經(jīng)過(guò)溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的大鼠B細胞淋巴瘤-X(Bcl-X)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm 波長(cháng)下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。
操作步驟
- 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
- 設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
- 樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
- 除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
- 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿(mǎn)洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
- 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
- 每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長(cháng)處測定各孔的OD值。
注:
由于現有條件及科學(xué)技術(shù)水平尚不能對所有供貨商提供的所有原料進(jìn)行全面的鑒定與分析,本產(chǎn)品可能存在一定的質(zhì)量技術(shù)風(fēng)險。
- 終的實(shí)驗結果與試劑的有效性、實(shí)驗者的相關(guān)操作以及當時(shí)的實(shí)驗環(huán)境密切相關(guān),請務(wù)必準備充足的標本備份。
- 不同批次的同一產(chǎn)品可能會(huì )有少許差別,如:檢測限、靈敏度以及顯色時(shí)間等,請依據試劑盒內說(shuō)明書(shū)進(jìn)行實(shí)驗操作,電子版說(shuō)明書(shū)僅作參考。
- 只有全部使用本試劑盒配套試劑才能保證檢測效果,不能混用其他制造商的產(chǎn)品。只有嚴格遵守本試劑盒的實(shí)驗說(shuō)明才會(huì )得到*的檢測結果。
- 本公司只對試劑盒本身負責,不對因使用該試劑盒所造成的樣本消耗負責,請使用者使用前充分考慮到樣本的可能使用量,預留充足的樣本。
- 使用化學(xué)裂解液制備的組織勻漿或細胞提取液可能會(huì )由于某些化學(xué)物質(zhì)的引入導致ELISA實(shí)驗結果偏差。
- 若樣本為細胞培養上清,因該類(lèi)樣本干擾因素較多,如:細胞狀態(tài)、細胞數量、采樣時(shí)間等,所以可能存在檢測不出的情況。
- 某些天然蛋白或重組蛋白,包括原核及真核重組蛋白,可能因為與本產(chǎn)品所使用的檢測抗體及捕獲抗體不匹配,而不被檢測出。