昆蟲(chóng)ELISA試劑盒操作流程細則

昆蟲(chóng)ELISA試劑盒中文簡(jiǎn)稱(chēng)：酶聯(lián)免疫法或酶免法問(wèn)：什么是種屬？什么是樣本？答：①種屬就是所謂的，客戶(hù)測得樣本來(lái)源是從什么動(dòng)物，植物，人，等，提取
的樣本，針對每個(gè)種屬有想對應的試劑盒，例如，從人的部位，收集的樣本，種屬就是人。那試劑盒就是測人的什么什么指標？動(dòng)物的就測動(dòng)物的什么指標等等。
②客戶(hù)從種屬身上提取的，包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養上清、組織勻漿，唾液等標本，（能溶的一般情況下都可以測）
昆蟲(chóng)ELISA試劑盒使用說(shuō)明書(shū)操作流程如下：
（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設3個(gè)平行孔；設兩個(gè)陰性對照孔，每孔加未處理組的細胞裂解液100μl；另設一個(gè)空白對照孔，加入純細
胞裂解液100μl。
（2）酶標板置4℃，包被過(guò)夜。
（3）洗板：吸干孔內反應液，用洗滌液過(guò)洗一遍（將洗滌液注滿(mǎn)板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿(mǎn)板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動(dòng)。甩去孔內液體后在吸水紙
上拍干。重復洗滌3-4次。
（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
（5）酶標板置37℃培養箱的濕盒內，孵育60min。
（6）洗板，同（4）。
（7）昆蟲(chóng)ELISA試劑盒每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
（8）酶標板置37℃培養箱的濕盒內，孵育60min。
（9）洗板，同（4）。
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應15-20min。
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
（12）昆蟲(chóng)ELISA試劑盒分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數據處理：在得出標本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計算S/N值。S/N≥21為陽(yáng)性判定標準。